一）拉曼光譜儀在乳腺癌診斷中的應(yīng)用價值

      乳腺癌是我國最為常見的女性癌癥，其早期診斷對于患者的治療十分重要。目前對于乳腺檢查(包括: 查體、彩超、鉬靶和磁共振成像等)所發(fā)現(xiàn)的異常(腫物、鈣化灶等), 只能通過手術(shù)活檢明確病變性質(zhì)，但是總體活檢后約70%~90% 的患者被證實為良性病變。由于病理診斷必須進(jìn)行手術(shù)獲取病變組織，結(jié)果受到取材組織的影響，缺乏全面性。 乳腺癌早期病灶（如導(dǎo)管原位癌）的組織形態(tài)學(xué)改變不明顯，傳統(tǒng)影像（超聲、鉬靶）易漏診。拉曼光譜作為一種重要的光譜學(xué)方法，越來越多地應(yīng)用于癌癥腫物的良惡性鑒別。在波長為 600~2000 cm?1的掃描范圍，拉曼光譜的每一個激發(fā)波長點上都會有不同的光譜強(qiáng)度。由于組織化學(xué)成分的不同，當(dāng)給定相同的激發(fā)波長時，特征峰和強(qiáng)度表示出多樣性。拉曼光譜可通過以下方式輔助早期發(fā)現(xiàn)：

• 檢測乳腺組織中生化成分的微小異常：例如，惡性細(xì)胞增殖會導(dǎo)致核酸含量升高、蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)改變（如 α- 螺旋減少），這些變化會在拉曼光譜上呈現(xiàn)特征峰偏移（如核酸相關(guān)峰 1094 cm?1 強(qiáng)度增加）；
• 可結(jié)合光纖探頭實現(xiàn)微創(chuàng) / 無創(chuàng)檢測：無需獲取完整組織標(biāo)本，僅通過體表或乳腺導(dǎo)管內(nèi)的光纖采集光譜，降低早期篩查的創(chuàng)傷性。

臨床中，部分乳腺結(jié)節(jié)（如不典型增生）的病理診斷存在 “灰色地帶"，拉曼光譜可提供客觀的分子層面依據(jù)，如表一所示：

     通過對比光譜特征差異區(qū)分良惡性：例如，惡性組織的脂質(zhì)峰（如 1440 cm?1、2850 cm?1）強(qiáng)度通常降低（因癌細(xì)胞過度消耗脂質(zhì)），而良惡性組織的光譜 “指紋" 差異可通過算法（如機(jī)器學(xué)習(xí)）量化，輔助病理醫(yī)生減少誤診 / 漏診。

      通過比較5種乳腺組織光譜（圖二）: 正常組織(NB)和4種病變組織(纖維腺瘤FD/癌前病變組織ADH/原位導(dǎo)管癌DCIS/ 浸潤性導(dǎo)管癌,IDC)，并進(jìn)行區(qū)分,利用 DNA 和 β-胡蘿卜素的特征峰可以將癌組織包括原位導(dǎo)管癌和浸潤性導(dǎo)管癌與其它乳腺組織區(qū)分。

      鈣化作為乳腺癌診斷的一個重要指標(biāo)經(jīng)常出現(xiàn)在乳腺的早期病變組織中，利用拉曼光譜分析纖維腺瘤、癌前病變和原位導(dǎo)管癌組織里中域型鈣化部位，從含有鈣化的良性和癌前病變的乳腺組織中獲得拉曼光譜(圖三)，利用主成分分析可以較好地對域型鈣化進(jìn)行鑒別。

        此外，在乳腺癌手術(shù)中，醫(yī)生需快速判斷切除邊緣是否殘留癌細(xì)胞，傳統(tǒng)冰凍切片需 30 分鐘以上，且存在取樣誤差，拉曼光譜可實現(xiàn)實時指導(dǎo)腫瘤精準(zhǔn)切除：

• 實時原位檢測

  ：通過手持探頭直接接觸手術(shù)切緣組織，1-2 分鐘內(nèi)獲取光譜并判斷是否存在癌細(xì)胞；

  
  

• 提高切緣陰性率

  ：幫助醫(yī)生精準(zhǔn)界定腫瘤邊界，減少因切緣陽性導(dǎo)致的二次手術(shù)，同時避免過度切除正常乳腺組織（保護(hù)患者外觀與功能）。

  
  

     綜上，拉曼光譜儀為乳腺癌診斷提供了 “分子層面" 的新工具，尤其在早期篩查、精準(zhǔn)鑒別及術(shù)中指導(dǎo)中潛力顯著，未來有望成為傳統(tǒng)診斷技術(shù)（影像、病理）的重要補(bǔ)充。